活性氧（ROS）测定试剂盒

活性氧（reactive oxygen species，ROS）广泛指代氧来源的自由基和非自由基，在机体内，ROS 的主要来源之一是线粒体内膜的呼吸链底物端，在线粒体中的电子传递链复合物将电子传递给O2 的过程中，有一部分O2 被还原，形成O2-或H2O2。其中，最为重要的是O2- ，它是大部分的ROS 的前体，主要由线粒体内膜呼吸链中的蛋白酶复合体Ⅰ、Ⅲ产生。在生物学背景下，ROS形成为氧的正常代谢的天然副产物，并且在细胞信号传导和体内平衡中具有重要作用。然而，在环境压力（例如，紫外线或热暴露）期间，ROS 水平会急剧增加。这可能会对细胞结构造成严重损害，这被称为氧化应激。 标本收集与样本准备： 1. 血清、血浆样本收集：应使用一次性的无热原，无内毒素试管（EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝均可），血清、 血浆避免使用溶血，高血脂标本，标本悬浮物应离心去除，使标本清澈透明，收集样品后直接检测，不需要 其他处理。 2. 细胞培养液、上清收集：取细胞培养上清液 500ul，4 度，5000rpm 离心10 分钟，取上清，样品直接检 测，不需要其他处理。 3. 细菌、细胞的收集：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清,按照500 万细菌或细胞加入1mL提取液的 比例，用超声波破碎细菌或细胞，5000g 4℃离心 15 分钟，取上清，置冰上待测。 4. 组织样本收集：将组织块用PBS漂洗干净，称取约 0.1g 组织，加入 1mL提取液，进行冰浴匀浆，5000g4℃离心 15 分钟，取上清，置冰上待测，待测样本应尽早检测，2-8℃保存 48 小时；更长时间须冷冻（-20℃以下）保存，避免反复冻融。 检测程序： 1. 加样：微孔板中分别加入对照品及待测样品50ul，加入反应液 100ul，室温灯光下反应10分钟。 2. 加显色液：每孔加入显色液 100ul，室温灯光下反应5分钟（显色结果根据反应情况而定，当对照品和空白孔颜色差异明显时，即可，在5分钟内读数）。 3. 读数：将反应好的微孔板用酶标仪在 560nm处读 OD 值。